$m_h :
$(val44[$m_h;]) $(val39[$m_h;])
$val11
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val15
$val14
$val13
$val12
$(val40[$m_h;])
$val6
G. Acrylamide ou agarose
$val13
$val14
F. ADN / protéines
$val29 ?
$val25
$val26
$val27
$val26
$val27 $val28
C. Anions/Cations
$val7
$(val6[1;])
$(val6[2*$m_k+1;])
$val8
N. Electrophorèse bidimensionnelle
Pour analyser des mélanges complexes de protéines, il peut être nécessaire de les séparer selon deux critères différents : leur point isoélectrique (pI) , par une éléctrofocalisation, et leur masse moléculaire, par une électrophorèse à travers un tamis moléculaire en présence de détergent (SDS). Le gel issu de l'électrofocalisation est placé au sommet d'un gel d'électrophorèse classique : la migration dans ce tamis moléculaire se fait à 90° de la direction d'électrofocalisation.
- $val7
- $val8 ?
A. L'électrophorèse sur gel : définition
$(val6[1;])
$(val6[2*$m_k+1;])
J. Masse moléculaire d'un polypeptide / protéines étalons
$val36 $val37
$val7
$m_h.
$(val44[$m_h;]) $(val39[$m_h;])
$val11
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val15
$val14
$val13
$val12
$(val40[$m_h;])
$val6
M. Migration dans un gradient de pH
$val34 $val35
$val7
$m_h :
$(val42[$m_h;]) $(val37[$m_h;])
$val11
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val15
$val14
$val13
$val12
$(val38[$m_h;])
$val6
I. Estimation de la masse moléculaire
$val35 $val36
$val6
$m_h :
$(val43[$m_h;]) $(val38[$m_h;])
$val10
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val14
$val13
$val12
$val11
$(val39[$m_h;])
H. Migration électrophorétique
$val35 $val36
$val6
$m_h :
$(val43[$m_h;]) $(val38[$m_h;])
$val10
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val14
$val13
$val12
$val11
$(val39[$m_h;])
L. Concentration en acrylamide
Des protéines dénaturées sont soumises à une électrophorèse sur gel de polyacryamide (SDS-PAGE) et révélées par le bleu de Coomassie. La concentration en acrylamide utilisée est choisie en fonction de la masse moléculaire des protéines étudiées.
- $val7 ?
- $val8 ?
B. Pourquoi un gel...pourquoi du SDS
$val35 $val36
$val6
$m_h.
$(val43[$m_h;])
$(val38[$m_h;])
$val10
$m_a
$m_a
$m_a
-
$val14
$val13
$val12
$val11
$(val39[$m_h;])
K. Réactifs pour électrophorèse
$val11
O. Western blot
$val9